在微生物的世界里，腐生葡萄球菌（Staphylococcus saprophyticus）算得上一个“低调又独特”的角色。它不像金黄，色葡，萄球菌那样“恶名远扬”，也不像表皮葡萄球菌那样经常出现在皮肤表面。腐生葡萄球菌主要和年轻女性的尿路感染有关，是导致非复杂性尿路感染的常见致病菌之一。
一、腐生葡萄球菌是什么？
腐生葡萄球菌隶属于葡萄球菌属，革兰氏染色呈阳性，在显微镜下呈现典型的葡萄串状排列。该菌无鞭毛，不形成芽孢，部分菌株具有微弱的荚膜结构。
它的学名“saprophyticus”源自希腊语，意为“与腐物相关”，这一命名暗示它最初是从环境中分离得到的。这一特性也使其与其他致病性更强的葡萄球菌形成鲜明区别：腐生葡萄球菌在自然界分布广泛，能在土壤、水体、污物等环境中存活，同时也可定植于人体，尤其常见于女性的会阴部及尿道口周围。
从生化特征来看，腐生葡萄球菌属于凝固酶阴性菌。人们提及“葡萄球菌”时，往往会联想到凝固酶阳性的类型，而腐生葡萄球菌恰好是凝固酶阴性的那一类。它还有一个重要特性：对新生霉素天然耐药。这一特性在实验室鉴别中至关重要，可用于将其与其他凝固酶阴性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌）区分开来。
二、临床意义：为什么需要培养它？
虽然健康人群中腐生葡萄球菌的携带率不高，但它却是年轻女性急性尿路感染的第二大常见致病菌，仅次于大肠杆菌。典型的情况是：一位性活跃期的年轻女性，出现尿频、尿急、尿痛，尿液检查显示白细胞增多，但普通培养基上却“没有大肠杆菌生长”——这时候，就要高度怀疑腐生葡萄球菌了。
此外，它偶尔也会引起其他感染，比如肾盂肾炎、尿道炎，甚至在少数情况下导致菌血症或心内膜炎（通常伴有泌尿系统操作史或基础疾病）。
正因为如此，在临床微生物实验室里，准确分离和鉴定腐生葡萄球菌，对尿路感染的病原学诊断有明确的指导价值。
三、培养前的准备工作
在进行腐生葡萄球菌培养之前，需要做好以下几项准备：
标本采集：对于疑似尿路感染，最常用的是中段尿标本。采集时要特别注意避免污染，女性患者应清洗外阴后留取中段尿。必要时可采用导尿或膀胱穿刺获取更可靠的标本。
运输与保存：尿标本采集后应尽快送检，最好在2小时内接种。如果不能及时处理，可以暂时保存在4℃冰箱，但不要超过24小时。
培养基选择：腐生葡萄球菌在普通培养基上就能生长，但为了提高检出率和鉴别能力，通常选用血琼脂平板或选择性培养基，比如CLED（胱氨酸-乳糖-电解质缺乏）培养基或甘露醇盐琼脂。
四、培养方法与操作步骤
接种：使用无菌接种环取混匀后的尿标本，采用划线接种法均匀涂布于培养基表面；若为定量培养，可使用定量接种环取1微升或10微升尿液，在平板上进行分区划线。
培养条件：将接种后的平板置于35-37℃恒温培养箱中，普通大气环境即可，无需额外补充二氧化碳。腐生葡萄球菌为需氧或兼性厌氧菌，在有氧条件下生长良好。
在血琼脂平板上：菌落呈白色或淡黄色，圆形，不透明，表面光滑，边缘整齐。它一般不引起溶血（即γ溶血），偶尔可见微弱的α溶血。
在CLED培养基上：菌落呈黄色，因为该培养基含有乳糖和指示剂，腐生葡萄球菌能发酵乳糖产酸，导致菌落周围培养基变黄。
在甘露醇盐琼脂上：由于腐生葡萄球菌通常不发酵甘露醇，菌落周围的培养基不会变黄（区别于金黄色，葡萄球，菌），但菌落仍能生长（因为它耐盐）。
纯化：如果原代平板上菌落生长混杂，需要挑取可疑菌落进行纯化培养。用接种环挑取单菌落，在新鲜血平板上再次划线，同样条件下培养18-24小时，获得纯培养物用于后续鉴定。
拿到纯培养物后，需要确认它是不是腐生葡萄球菌。常用以下手段：
革兰染色：镜下应为革兰阳性球菌，呈葡萄串状排列。
触酶试验：阳性（滴加3%过氧化氢后产生气泡）。
凝固酶试验：阴性（包括玻片法和试管法）。
新生霉素敏感性试验：这是区分腐生葡萄球菌和其他凝固酶阴性葡萄球菌的关键。将新生霉素纸片贴在接种了菌液的平板上，35℃培养18-24小时后，抑菌圈直径≤16毫米即可判断为耐药，提示腐生葡萄球菌；而表皮葡萄球菌等通常是敏感的。
其他生化反应：腐生葡萄球菌能发酵蔗糖、海藻糖，通常不发酵木糖，尿素酶阳性，硝酸盐还原阳性。
现在很多实验室也使用自动化鉴定系统（如VITEK、API Staph）或质谱技术（MALDI-TOF MS）进行快速鉴定，准确率很高。
六、培养中的常见问题与注意事项
标本污染问题：尿标本很容易被皮肤表面的表皮葡萄球菌污染。如果培养出的菌落量较少（比如<10^4 CFU/mL），且来自女性患者，不一定有意义。临床上通常以≥10^5 CFU/mL作为诊断尿路感染的参考阈值，但对于腐生葡萄球菌，部分指南认为≥10^4 CFU/mL结合临床症状也应考虑。
生长缓慢：少数腐生葡萄球菌菌株在初次分离时生长较慢，需要延长培养至48小时才能看到明显菌落。
耐药性变化：虽然腐生葡萄球菌对新生霉素天然耐药，但对其他常见抗生素如呋喃妥因、磷霉素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑通常敏感。实验室在报告药敏结果时，需要注意结合CLSI或EUCAST标准。
与其他菌的混淆：某些凝固酶阴性的葡萄球菌（如松鼠葡萄球菌）也可能对新生霉素耐药，必要时应结合质谱或分子方法进一步确认。
七、小结
腐生葡萄球菌的培养并不复杂，它的难点主要在于如何把它与标本中的污染菌区分开来，以及如何准确利用新生霉素耐药这一特征进行鉴定。对于临床微生物工作者来说，掌握它的菌落形态、生化特征和药敏特点，可以帮助更准确地诊断由其引起的尿路感染，避免漏诊或误报。
